Graphpad Prism如何进行Elisa分析 Graphpad Prism如何进行方差齐性检验

品牌型号：联想 小新14

系统：Windows 10

软件版本：GraphPad 10.4.0（621）

在日常科研实验里，ELISA和显著性差异分析是经常要做的分析。很多同学做完ELISA实验，对着一堆OD值不知道怎么在Graphpad Prism里做出标准曲线、算出样品浓度。又或者是做差异分析时忽略了方差齐性检验，导致统计结果不严谨。今天我们就和大家一起来探讨一下关于Graphpad Prism如何进行Elisa分析，Graphpad Prism如何进行方差齐性检验的问题。

一、Graphpad Prism如何进行Elisa分析

ELISA也就是酶联免疫吸附试验，在生物医学、免疫相关实验还有临床检测里经常用到。Elisa分析主要用来做定性或者定量检测。用GraphPad Prism处理ELISA数据，一方面能做出标准曲线，看看这次实验做得好不好；另一方面也能把测出来的OD值转成实际浓度，直接用在论文和实验报告里。下面就一起来看看在Graphpad Prism中如何进行Elisa分析的具体操作方法。

1、首先把数据整理好，放excel表格中，如下图所示。

2、打开Graphpad Prism软件，在创建界面选择XY，因为我们的数据是单个值，所以Y这里选第一个选项，如图2所示。

3、将excel表格中的数据复制粘贴到Graphpad Prism新建的数据表格里，X列输入浓度，Y列输入OD值。

4、在顶部上方找到Analysis工具，点击其下方的Fit a curve with nonlinear regression图标，进行曲线拟合。

5、会弹出一个Parameters: Nonlinear Regression对话框，进入到Model页面，找到Standard curves to interpolate选项并点击，在其下拉菜单中我们选择Sigmoidal, 4PL, X is concentration选项。

6、点击进入到Method页面，在Weighting method这里选择加权方法，加权方式选第二个，点OK运行拟合。

7、在弹出的结果界面查看R²值，一般大于0.98或0.99就说明曲线可用，比如这次结果是0.9994，可以继续用。

8、之后回到数据表，把样品的OD值输进去。再次点击曲线拟合，弹窗里选第一个选项确定，参数和之前一样设置，记得把最下面的Interpolate勾选上。

9、Method里加权方式还是选第二个，确定之后，就会出现Interpolated X meanvalues表格，里面就是软件算出来的样品对应浓度，整个ELISA分析就完成了。

二、Graphpad Prism如何进行方差齐性检验

方差齐性，指的是两组或多组数据的波动程度差不多。比如两组数据的分布范围，最大值和最小值之间的差距差不多。一般来说，在进行显著性差异分析之前需要判断数据是否符合正态分布和方差齐性。那么下面我们就一起来看看在Graphpad Prism中如何进行方差齐性检验的具体操作方法。

判断方差齐性，这里分两种情况：两组数据，和三组及以上数据。先讲第一种两组数据，怎么判断方差齐性。

1、首先打开Graphpad Prism软件数据导入后，点击顶部上方的Analyze工具，弹出窗口中选Column analyze，再选t test检验，点OK。

2、在弹出T检验设置里，根据我们的实验设计选类型，选择独立样本t test 或者是配对样本 t test 。接着下面的方差齐性选择第一个选项，先默认方差齐性，点OK，运行分析。

3、分析完之后，在结果表里看F检验。如果F检验的P＞0.05，说明满足方差齐性，再看T检验的P大于0.05，就说明没有显著性差异。

4、如果F检验的P＜0.05，就说明方差不齐，要回去重新设置。再次选t test，进入设置界面，但这时候要换成Welch校正的t test，也就是第二个选项，点OK重新分析。

第二种是三组及以上数据，怎么判断方差齐性。

1、同样是在Graphpad Prism软件数据导入后，点击Analyze选项，选择Column analyze，再选 one way anova，点OK。

2、弹出的设置界面，找到下面询问数据是否方差齐性的选项，同样是先默认勾选第一个选项。点击OK按钮，开始分析。

3、查看ANOVA results结果表格，这里的Brown-Forsythe test结果P＞0.05，说明方差齐性成立，如果这里P＜0.05，说明方差不齐，就要回去选 Welch 校正。

以上就是Graphpad Prism如何进行Elisa分析，Graphpad Prism如何进行方差齐性检验的全部内容。文中详细列出了用Graphpad Prism做ELISA分析和方差齐性检验的全部流程，只要按步骤选择正确的模型和参数，就能快速得到分析结果。希望文章的内容能帮助到有需要的小伙伴。

署名：梦